最常用:把组织按固定厚度(如 10–20 μm)切为连续片,每片独立成像得到二维分子图,再用显微坐标或组织学特征将各层对齐,堆叠为体积。
部分源可在同一表面不同深度重复采样或具备 z 向分辨,直接获得三维信息,省去物理切片堆叠。但深度分辨受解吸/溅射纵向扩散限制,多用于表层数微米。
SIMS 的溅射本身具深度剖析能力,可在剖析同时积累三维体素,是原位 3D 的代表路线之一。
切片形变、染色/成像顺序导致的组织损耗,都会让层间错位。需用连续切面形态学特征或 fiducial 标记做非刚性配准。
配准质量直接决定 3D 可信度;建议在方法学中报告配准误差与验证方式。
3D MSI 用于器官内药物渗透体积、肿瘤三维异质性、植物组织立体代谢等。输出是「每个分子一张体积图」,可与 空间组学 分析衔接。
数据量大,需配套 分析软件 与标准格式管理。
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