基质在 MALDI 中承担能量吸收与质子转移双重角色:它吸收激光防止分析物直接光解,并将能量传递给周围分子促其解吸电离。喷涂需均匀、细晶,以避免局部过厚导致扩散或掩盖细微分布。
常用工艺包括气动手喷、升华沉积与微滴阵列;参数(基质种类、浓度、溶剂、温湿度)需针对组织与待测物优化,不当喷涂会引入背景或造成分子迁移。
基质本身会在低 m/z 区产生强背景、可能掩盖小分子与代谢物信号,且喷涂是额外前处理步骤。免基质路线通过特殊源规避:LDPI/DPI 以光化学电离在免基质环境工作;无基质 MALDI 通过特殊靶面或升华工艺减少基质;DESI 本身不依赖 MALDI 基质。
免基质的直接收益是小分子区背景更低、前处理更短;代价是部分分子的信号增益机制不同,需针对待测物验证覆盖度。
基质在 m/z < 700 区域常出现簇离子与加合峰,干扰药物、代谢物等小分子成像,即“小分子基质干扰”问题。免基质或优化基质(如减少低 m/z 背景的配方)是主要对策。
对小分子成像需求强的项目,优先考虑免基质源(LDPI、DPI)或经验证的低背景基质方案,以保留小分子区的有效信号。
若待测物以蛋白、肽、脂质为主且接受前处理,基质喷涂 MALDI 是成熟稳定方案;若聚焦小分子、代谢物或要求最短前处理,免基质源(LDPI/DPI)或免基质 MALDI 更合适。
无论哪种策略,前处理一致性都决定成像可重复性;建议建立标准喷涂或免基质采样 SOP,并与后续分析软件(SCiLS Lab、MetaboScape)的配准流程衔接。
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